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【蛋白质的氨基酸组成自动色谱分析法】


作者:活力达商城  发布日期:2009-08-11

蛋白质的氨基酸组成分析,大多采用自动色谱分析法。其测定过程分为两步:

1.水解蛋白质释放出氨基酸
常用的方法,就是在隔绝空气的条件下用盐酸水解,从而使蛋白质的肽键发出断裂,产生氨基酸混合液。这种水解法对于那些对酸比较稳定的氨基酸来说,一般都可以获得比较好的结果。但是,有胱氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸和色氨酸时,必须用另外的办法进行水解。含有胱氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸和色氨酸的蛋白质,一般在水解前需要先对这些不稳定的氨基酸进行处理。优先反应,或进行保护。大多数情况下,是先控制反应条件,用过甲酸进行氧化,使上述氨基酸都转变为其氧化物磺基丙氨酸和蛋氨酸砜。所生成的这些对酸稳定的氧化物,可以再通过盐酸水解法从蛋白质中分离出来。

2.氨基酸的色层分离及测定
氨基酸的色谱分析可以用氨基酸自动分析仪进行。比色波长选择在570mm或440mm处,然后用数据处理或三角测量法计算记录峰的面积,通过标准样品的氨基酸含量与面积的关系,就可以得出所测样品的氨基酸含量值。

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编辑:Gabriel Wang

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